التعليمات

الأسئلة الفنية الشائعة (FAQs)

الأسئلة الفنية الشائعة ، يجيب عليها فريق الدعم الفني الخبير لدينا

أ. هل يمكنني الحصول على عينة مجانية من المنتج؟

نحن لا نقدم عينات مجانية أو بحجم تجريبي لأغراض الاختبار. سياستنا هي أنه إذا لم يعمل الجسم المضاد على النحو المحدد في ورقة البيانات ، فسوف نقدم استبدال أو استرداد. إذا تم استخدام الجسم المضاد في أنواع أو تطبيقات لم يتم اختبارها ، فلا يمكننا تقديم بديل أو استرداد.
ب. كيف يمكنني اختيار الأجسام المضادة الثانوية المناسبة؟
يجب رفع الأجسام المضادة الثانوية ضد الأنواع المضيفة كجسم مضاد أساسي تستخدمه. على سبيل المثال ، إذا كان الابتدائي لديك أحادي النسيلة للماوس ، فستحتاج إلى مضاد ثانوي للماوس.

كيف يمكنني اختيار عنصر تحكم النظائر؟
تُستخدم ضوابط النمط المتماثل لتأكيد أن ارتباط الجسم المضاد الأساسي محدد وليس نتيجة لربط مستقبلات Fc غير محددة أو تفاعلات بروتينية أخرى. يجب أن يتطابق الجسم المضاد للتحكم في النمط المتماثل مع الأنواع المضيفة الأولية للجسم المضاد ، والنمط النظري ، والاقتران. على سبيل المثال ، إذا كان الجسم المضاد الأساسي عبارة عن ماوس IGG1 مترافق مع FITC ، فستحتاج إلى اختيار عنصر تحكم متماثل IGG1 للماوس المترافق مع FITC.

كيف يمكنني اختيار عنصر تحكم إيجابي؟
يمكنك إجراء بحث سريع في الأدبيات على PubMed لمعرفة الأنسجة والخلايا التي تعبر عن البروتين الذي يهمك.

كيف أقوم بتقسيم أجسام مضاد؟
يعتمد حجم القسامات على مقدار ما يستخدمه المرء عادة في التجربة. ألا تقل القسائم عن 10 ؛ كلما صغر حجم القسمة ، كلما تأثر تركيز المخزون بشكل أكبر بتبخر وامتصاص الجسم المضاد على سطح قارورة التخزين.

 كيف يمكنني تحديد ما إذا كان الأجسام المضادة قد تكتشف في الأنواع غير المختبرة؟
CUSABIO غير قادر على ضمان عمل جسم مضاد في الأنواع غير المختبرة ، حتى إذا كانت محاذاة التسلسل عالية. هناك العديد من المتغيرات المشاركة في تحديد ما إذا كان الجسم المضاد سوف يرتبط بأنواع أخرى.
إذا لم تكن هناك بدائل متاحة ، ومن الضروري أن تفكر في شراء جسم مضاد للاستخدام في الأنواع التي لم يتم اختبارها ، نوصي بالتحقق من محاذاة تسلسل المناعة مع البروتين الذي تهتم به.

ز- هل يتفاعل هذا الجسم المضاد مع شكل آخر من هذا البروتين ، أو بروتين من نفس “العائلة”؟
نوصي بالتحقق من محاذاة تسلسل المناعة مع الأشكال المتشابهة أو البروتينات الأخرى التي تهتم بها. هناك العديد من مواقع الويب التي توفر أداة لحساب نسبة المحاذاة.
خذ نسخة من تسلسل المناعة للجسم المضاد وقم بمحاذاة تسلسل البروتين من الأنواع التي ترغب في اختبارها. نوصي بدرجة محاذاة تزيد عن 85٪ كمؤشر جيد على أن الجسم المضاد قد يتفاعل معًا. لذلك نوصي بأن تكون النسبة المئوية للمحاذاة أقل بكثير بحيث يشير ذلك إلى أنه لا يجب أن يكون هناك تفاعل متبادل.

لماذا يختلف حجم شريط اللطخة الغربي الفعلي عن المتوقع؟
النشاف الغربي هو تقنية تفصل البروتينات حسب الحجم. بشكل عام ، كلما كان البروتين أصغر كلما كان أسرع في الترحيل عبر الجل. ومع ذلك ، فإن الهجرة تتأثر أيضًا بعوامل أخرى ، لذلك قد يختلف الحجم الفعلي للملاحظة عن ذلك المتوقع. تشمل العوامل الشائعة ما يلي:
تعديل ما بعد الترجمة – على سبيل المثال ، الفسفرة ، الارتباط بالجليكوزيل ، إلخ ، مما يزيد من حجم البروتين
بعد الانقسام – على سبيل المثال يتم تصنيع العديد من البروتينات على أنها بروتينات بروتينية ثم تنشق لإعطاء الشكل النشط ، على سبيل المثال pro-caspases
 المتغيرات – الربط البديل قد يخلق بروتينات مختلفة الحجم تنتج من نفس الجين
الشحنة النسبية – تكوين الأحماض الأمينية (مشحونة مقابل غير مشحونة)
Multimers – على سبيل المثال التفتت في البروتين. عادة ما يتم منع ذلك في تقليل الظروف ، على الرغم من أن التفاعلات القوية يمكن أن تؤدي إلى ظهور نطاقات أعلى

اترك تعليقاً